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c-myc,小鼠癌基因產(chǎn)物ELISA試劑盒原理

更新時(shí)間:2022-08-28

簡(jiǎn)要描述:

c-myc,小鼠癌基因產(chǎn)物ELISA試劑盒原理用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠癌基因產(chǎn)物(c-myc)的含量。

型號(hào):點(diǎn)擊量:1024

【產(chǎn)品名稱】:c-myc,小鼠癌基因產(chǎn)物ELISA試劑盒原理

【檢測(cè)方法】:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)

【產(chǎn)品性狀】:96T/48T,盒裝液體

【貯    藏】:2-8°C

【有 效 期】:Elisa試劑盒二年,我公司Elisa試劑盒均為批次,可放心購(gòu)買。

【主要成分】:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。

【標(biāo)    本】:血清/血漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清液/組織勻漿/組織液/尿液/分泌物

【質(zhì)量承諾】:我們堅(jiān)持對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量作不斷的評(píng)估、創(chuàng)新和改善以確保您對(duì)我們產(chǎn)品的高度信任。

【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等

【樣品采集】:Elisa試劑盒收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃可保存1個(gè)月。-70℃可保存6個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。

【保 質(zhì) 期】:半年(六個(gè)月)

特點(diǎn)概述

1.專一性強(qiáng)。抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測(cè)的對(duì)象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無(wú)多大差別。

2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測(cè)的靈敏性,使檢測(cè)水平接近放射免疫測(cè)定法。

3.樣品易保存。經(jīng)過(guò)酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。

4.結(jié)果易觀察。對(duì)檢測(cè)結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)進(jìn)行比色測(cè)定,還可用顯微鏡觀察。這是因?yàn)槟承┟阜磻?yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測(cè)物的顯示。

5.可以定量測(cè)定。溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測(cè)定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對(duì)組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測(cè)定。

6.可以大規(guī)模測(cè)定樣品。如有成千上萬(wàn)份樣品需要進(jìn)行檢測(cè),免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。

7.儀器和試劑簡(jiǎn)單。對(duì)免疫沒(méi)技術(shù)來(lái)說(shuō),不需要熒光顯微鏡,也不需要測(cè)定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購(gòu)置

6、*,質(zhì)量保證,zui大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

ELISA試劑盒檢測(cè)概述
    ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析)是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
實(shí)際應(yīng)用中,通過(guò)不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。目前我們對(duì)客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:

1.  試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存試劑。  實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。

2.   加樣:加樣或加試劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),*個(gè)孔與zui后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。

3.   孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。

4.   洗滌:洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。

常見(jiàn)問(wèn)題解答

小編簡(jiǎn)單整理了5個(gè)問(wèn)題,具體內(nèi)容如下:

1、一個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)幾個(gè)樣品?

小編自己在各大論壇看到zui多的三個(gè)答案:

1)48T 可做42個(gè)樣本加6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線;96T 可做90個(gè)樣本加6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線

2)以96T試劑盒來(lái)算,定量的試劑盒一般可以做90個(gè)左右的樣品,定性的試劑盒可以做94個(gè)左右的樣品

3)96T的ELISA試劑盒,去除標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)孔檢測(cè),zui多還能檢測(cè)80個(gè)標(biāo)本;48T的zui多30個(gè)樣本。

2、elisa試劑盒96T的能做檢測(cè)多少血清樣品?板能重復(fù)利用嗎?

96T,一般做復(fù)孔的話,做標(biāo)準(zhǔn)曲線需要16個(gè)孔,剩下80個(gè)孔就可以做40個(gè)樣本。這個(gè)板不能重復(fù)利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的。

3、想請(qǐng)教一下,我想用elisa法測(cè)血清里的一種抗原,查了資料,發(fā)現(xiàn)沒(méi)有現(xiàn)成的試劑盒用,現(xiàn)在就有2種備選方案,一種是買抗體對(duì)自己包被(查了R&D等大公司都沒(méi)有可用于elisa的單抗)。哪種比較好呢?自己包被的會(huì)不會(huì)比國(guó)產(chǎn)的試劑盒可靠呢?

如果你覺(jué)得技術(shù)不錯(cuò)有隊(duì)其他公司不放心,可以自己購(gòu)買抗體對(duì)自己包被,這個(gè)就是麻煩點(diǎn),自己包被用著放心,舒心;

4、western 和ELISA 處理樣本有何差別?

Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液(含有蛋白酶抑制劑),然后冰上研磨,收集于EP管,冰上裂解30min,4度12000rpm離心15min,取上清分裝,即得到蛋白樣品。建議直接電泳,多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量,一次性用完一支,避免反復(fù)凍融。

ELISA樣品,直接腦組織冰上勻漿,收集于EP管,同上一樣離心,大約220-250ul每支分裝(因?yàn)镋LISA上樣量基本都是每孔100ul,做復(fù)孔,每個(gè)樣品2孔,就需要200ul,為了避免不夠2孔,分裝時(shí)要大于200ul每支),直接實(shí)驗(yàn)。多余的-80保存,一樣避免反復(fù)凍融。

不過(guò)ELISA少量樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),或者查閱文獻(xiàn),看看大概組織里有多高濃度,選擇合適的試劑盒,測(cè)量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過(guò)高測(cè)量不準(zhǔn),或者濃度過(guò)低,小于試劑盒zui低可測(cè)濃度。

Elisa試劑盒該買哪家公司的呢?

提出這個(gè)問(wèn)題的朋友其實(shí)該打,目前上各個(gè)品牌的試劑盒生廠商,都會(huì)有其偏重點(diǎn),像BIM、R&D等品牌在細(xì)胞因子方面的試劑盒就非常,而其他牌子也一樣的。

Bender:粘附分子方面的試劑盒;

Cayman:花生四烯酸類產(chǎn)品的試劑盒;

Merck(Linco):內(nèi)分泌研究方面的試劑盒;

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